에비던트 현미경 공식 대리점, evident, 올림푸스 현미경 > 올림푸스 > 레이저스캐닝 현미경 http://olympus119.co.kr/bbs/board.php?bo_table=All_In_One 테스트 버전 0.2 (2004-04-26) ko FV4000MPE http://olympus119.co.kr/bbs/board.php?bo_table=All_In_One&wr_id=6 혁신적인 정밀 이미징

생체 내 실험을 위한 심층 정밀도

FLUOVIEW™ FV4000MPE 다광자 레이저 스캐닝 현미경으로 이미지를 변화시키세요. 고급 이미징 기술은 실험을 향상시킬 수 있는 정량적 이미지 데이터를 제공하는 동시에 샘플의 세부 사항과 움직임을 보여줍니다. 시스템의 핵심인 획기적인 SilVIR 검출기를 사용하면 노이즈를 대폭 낮추고 감도를 높이며 광자 분해 기능을 개선할 수 있습니다. 빠른 움직임을 포착하기 위해 고속 기능을 결합한 이 시스템은 까다로운 연구 분야를 지원합니다.


다광자 이미징 간소화

FV4000MPE 현미경은 정밀하고 재현 가능한 데이터를 그 어느 때보다 쉽게 획득할 수 있는 고급 실리콘 기반 SilVIR™ 검출기를 사용합니다.

SilVIR 차세대 검출기 기술

SilVIR 검출기는 SiPM(실리콘 광전자 증배관)과 Evident의 특허받은* 고속 신호 처리 설계라는 두 가지 고급 기술을 결합합니다.

  • 높은 동적 범위
  • 저소음
  • 감도 저하 없음
  • 다른 검출기 간의 감도 변화가 적음

*특허번호 US11237047

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TruResolution 대물렌즈를 사용해 표면에서 900µm 깊이까지 살아있는 마우스 뇌를 촬영한 3D 이미지. SilVIR 검출기의 높은 동적 범위 덕분에 신경 세포체의 채도가 손실되지 않았습니다.
샘플 제공: Aoi Gohma 및 Atsushi Miyawaki, RIKEN CBS-EVIDENT 개방형 협업 센터.

뛰어난 다광자 심부 이미지

TruResolution 대물렌즈가 장착된 FV4000MPE 현미경은 여기 레이저 출력을 집중시켜 더 밝은 이미지를 획득함으로써 샘플 심부의 형광 염료를 효율적으로 여기시킬 수 있습니다. 고급 SilVIR NDD(비 디스캔 검출기, Non-Descanned Detector)는 빔 직경이 더 크기 때문에 샘플의 심부 위치에서 산란된 형광 방출을 보다 효과적으로 수집할 수 있습니다. 업그레이된 NDD는 다색 다광자 이미징을 위해 최대 6개 채널로 구성할 수 있습니다. 공진 스캐너를 사용하면 대용량 3D 이미지를 빠르게 획득할 수 있습니다.

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10배율 대물렌즈와 공진 스캐너를 사용하여 캡처한 투명화된 전체 뇌의 스티칭 이미지(512 x 512픽셀, Z 501개 슬라이스, 225개 위치). 새로운 공진 스캐너는 1/3 미만의 시간 내에 galvo 스캐너와 동일한 품질의 이미지를 획득할 수 있는 기능을 갖추고 있습니다.
샘플 제공: Tetsushi Hoshida 및 Atsushi Miyawaki, RIKEN CBS 세포 기능 역학부 실험실.


고품질의 고속 타임랩스 이미징

  • 업그레이드된 공진 스캐너를 사용하면 더 넓은 영역의 고해상도 이미지를 고속으로 획득할 수 있습니다.
  • SilVIR 검출기의 고감도는 다른 검출기 유형보다 더 나은 신호 대 잡음비를 제공하여 고속, 고품질의 이미지를 생성하므로 생세포의 움직임을 정밀하게 획득할 수 있습니다.


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iGluSnFR을 사용한 생체 내(in-vivo) FrA 피질의 글루탐산성 시냅스 입력을 시각화한 그림. 이미지 제공: Katsuya Ozawa 및 Akiko Hayashi-Takagi, RIKEN CBS 다중 스케일 생물 정신의학.

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jRGECO1a를 사용한 마우스 피질 뉴런의 생체 내(in-vivo) Ca2+ 이미징. 이미지 제공: Katsuya Ozawa 및 Akiko Hayashi-Takagi, RIKEN CBS 다중 스케일 생물 정신의학.


신뢰할 수 있는 지원 및 서비스

FV4000MPE 시스템은 유지보수가 쉽습니다.

  • 반도체 기반 SilVIR 검출기는 안정적이고 내구성이 뛰어납니다.
  • 레이저 출력 모니터는 조명 상태를 지속적으로 확인하고 일정한 레이저 출력을 유지하도록 조정합니다.
  • 시스템 관리자는 로그 파일을 보고 서비스 유지보수 일정을 추적할 수 있습니다.

Evident는 고객이 목표를 달성할 수 있도록 신속한 서비스와 기술 지원을 약속하며 제품을 지원합니다. Evident는 현미경이 예측 가능한 비용으로 최고의 성능을 발휘할 수 있도록 다양한 지원 계획과 원격 지원 옵션을 제공하므로 문제가 있는 경우 엔지니어나 전문가가 방문할 때까지 기다릴 필요가 없습니다.


하나의 시스템에서 다양한 기능 사용

응용 분야에 따라 정립, 갠트리 또는 도립 현미경 프레임 중에서 선택할 수 있습니다.

모듈식으로 설계된 FV4000MPE 현미경은 응용 분야와 예산에 따라 시스템을 쉽게 구성할 수 있습니다. 표준 FV4000MPE으로 시작하고 연구가 변화함에 따라 SPE 모듈을 추가하여 콤보 시스템으로 쉽게 업그레이드할 수 있습니다.

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정립 현미경 시스템 - 생체 및 시험관 다광자 현미경용

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갠트리 현미경 시스템 - 더 큰 공간이 필요한 생체 관찰용

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도립 현미경 시스템 - 3D 세포(스페로이드) 및 조직 배양의 시험관 관찰용


사용자 맞춤 구성 요소 추가

사용자 맞춤 구성 요소를 통합하여 시스템의 사용자 지정 옵션을 한 단계 더 높은 수준으로 끌어올리세요. 예를 들어, 사용 가능한 포트에 사용자 맞춤 레이저를 추가할 수 있는 옵션이 있으며, 이를 통해 3광자 또는 이미징 방법과 같은 고급 기술을 사용할 수 있습니다.

과학은 계속 발전하고 있으며 이미징 시스템에 대한 끊임없이 변화하는 요구 사항을 충족하려면 다이내믹한 솔루션이 필요합니다. 고객의 연구 역량을 확대하기 위해 FV4000/FV4000MPE 전문 솔루션*은 고객의 연구 분야와 요구 사항을 충족하도록 표준 시스템의 기능을 향상시킵니다.


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스캐너 검류계 스캐너(일반 이미징) 64 × 64 ~ 4096 x 4096픽셀, 1μs/픽셀 ~ 1000μs/픽셀
공진 스캐너(고속 이미징) 512 × 512픽셀, 1024 × 1024픽셀
시야수(FN) 20
스펙트럼 컨포컬 검출기 검출기 SilVIR 검출기(냉각형 SiPM, 광대역 유형/적색편이 유형)
최대 채널수 6개 채널
스펙트럼 방식 VPH, 검출 가능한 파장 범위 400nm~900nm
비 디스캔 검출기 검출기 SilVIR 검출기(냉각형 SiPM, 광대역 유형/적색편이 유형)
최대 채널수 6개 채널
레이저 VIS 레이저 405nm, 445nm, 488nm, 514nm, 561nm, 594nm, 640nm
NIR 레이저 685nm, 730nm, 785nm
IR 펄스 레이저 모노 레이저 시스템, 듀얼 라인 시스템, 듀얼 레이저 시스템
여기 파장: 690nm ~ 1300nm
4축 자동 정렬, 자동 빔 익스팬더
이미지 높은 동적 범위 광자 계수(1G cps)
]]> 임진과학 Tue, 27 Feb 2024 10:58:11 +0900 FV4000 http://olympus119.co.kr/bbs/board.php?bo_table=All_In_One&wr_id=5 정밀 이미징 혁신

컨포컬 현미경 이미징 실험 강화

새로운 FLUOVIEW™ FV4000 컨포컬 레이저 스캐닝 현미경으로 이미지를 변화시키세요. 고급 이미징 기술을 사용하면 고정밀 이미지를 통해 연구원이 샘플에서 더욱 신뢰할 수 있는 데이터를 얻을 수 있습니다. 시스템의 핵심인 획기적인 SilVIR™ 검출기를 사용하면 노이즈를 대폭 낮추고 감도를 높이며 광자 분해 기능을 개선할 수 있습니다. 연구원은 FV4000 컨포컬 현미경을 사용하여 더 적은 시간과 노력으로 고품질의 정량적 이미지 데이터를 얻을 수 있습니다.


손쉽게 획득하는 정량적 컨포컬 데이터

FV4000 컨포컬 현미경은 정밀하고 재현 가능한 데이터를 그 어느 때보다 쉽게 획득할 수 있는 고급 실리콘 기반 SilVIR™ 검출기를 사용합니다.

SilVIR 차세대 검출기 기술

SilVIR 검출기는 SiPM(실리콘 광전자 증배관)과 Evident의 특허받은* 고속 신호 처리 설계라는 두 가지 고급 기술을 결합합니다.

  • 높은 동적 범위
  • 저소음
  • 감도 저하 없음
  • 다른 검출기 간의 감도 변화가 적음

*특허번호 US11237047

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녹색의 뉴로필라멘트 헤비 체인(NFH), 빨간색의 미엘린 단백질(MBP), 파란색의 글루타치온 S-전이효소 pi 1(GSTpi). UPLXAPO40X 대물렌즈로 캡처한 마우스의 소뇌.
샘플 제공: Katherine Given, Ph.D. 콜로라도주 오로라 소재 콜로라도 대학교 안슈츠 의학 캠퍼스(University of Colorado Anschutz Medical Campus) 신경생물학과 연구 책임자


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SilVIR 검출기를 사용하여 캡처한 이미지의 히스토그램으로, 강도를 광자 수로 변환할 수 있는 개별 패턴을 보여줍니다. 검출기의 형광 강도는 광자 수로 정량화할 수 있으며 배경 수준은 매우 낮습니다.


컨포컬 이미지에서 더 많은 정보 획득

고감도 SilVIR 감지기와 결합된 시스템의 업데이트된 TruSpectral 기술을 사용하면 최대 6개 채널을 동시에 멀티플렉싱할 수 있어 더 많은 정보를 발견할 수 있습니다.

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마우스 해마의 신경혈관 단위. 파란색(DAPI 세포 핵), 녹색(GFAP AF488). Astrocytes(노란색). DsRed pericytes(자홍색), 콜라겐 IV AF647 혈관 기저막(회색), AQ-4. Astrocytes 수로.
샘플 제공: Hiroshi Hama 및 Atsushi Miyawaki, RIKEN CBS 세포 기능 역학부.
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CytoSkelton 샘플: DAPI(파란색), Pericentrin(중심체, 녹색), a-Tubulin(미세소관, Alexa-568, 빨간색) 및 팔로이딘(액틴, Alexa-647, 자홍색)으로 염색된 헬라 세포.
샘플 제공: 샘플 준비 Alexia Ferrand, 샘플 획득 Sara R. Roig 및 Alexia Ferrand. 바젤 대학교(University of Basel) 바이오센터(Biozentrum)의 이미징 코어 시설(maging Core Facility).

유연한 매크로-마이크로 이미징

매크로-마이크로 워크플로를 통해 매크로 수준(전신 또는 조직)에서 세포 또는 세포 내 수준까지 표적 샘플을 쉽게 관찰할 수 있습니다.

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초파리 날개의 개요 및 가장자리 이미지(42시간 번데기화) 팔로이딘(AlexaFluor 405, F-액틴, 청록색), 항포스포티로신 항체(AlexaFluor 555, 세포 표면, 빨간색), 항-HRP 항체(AlexaFluor 647, 축삭섬유, 파란색)으로 염색. 샘플 제공: Sun Zhengkuan 및 Shigeo Hayashi, 일본 RIKEN BDR(Biosystems Dynamics Research 센터의 형태발생 신호 실험실(Laboratory for Morphogenetic Signaling).


고품질의 고속 타임랩스 컨포컬 이미징

스마트 기능을 사용하면 타임랩스 이미징이 더 쉬워집니다.

  • 생세포 역학의 모든 순간 포착: 공진 스캐너는 넓은 영역에 걸쳐 고해상도 이미지를 획득할 수 있습니다.
  • 최소 광독성: 스캐너의 짧은 픽셀 드웰 시간으로 인해 집중 레이저 빔이 단일 스폿에 머무르는 시간이 줄어듭니다.
  • 신호 대 잡음비 개선: SilVIR 검출기의 고감도가 고속, 고품질의 이미지를 생성합니다.
  • 정밀도 향상: 롤링 평균 처리로 적격성과 시간 해상도가 유지됩니다.


사용자와 시스템 간 재현 가능한 이미지 데이터

SilVIR 검출기는 이전 세대 검출기 기술에 비해 시간 경과에 따른 감도 손실이 적습니다. Evident의 레이저 출력 모니터(LPM) 및 TruFocus™ Z 드리프트 보상기를 사용하면 일관된 조건에서 재현 가능한 이미지를 얻어 재현성을 높일 수 있습니다. 다른 날, 다른 사용자도 동일한 설정을 사용하면 동일한 정밀 이미지를 얻을 수 있습니다. 서로 다른 FV4000 현미경으로 획득한 이미지도 동일한 광자수 강도 척도를 사용하여 비교할 수 있습니다.


신뢰할 수 있는 현미경 지원 및 서비스

Evident는 유지보수가 쉽도록 FV4000 시스템을 설계했습니다.

  • 반도체 기반 SilVIR 검출기는 안정적이고 내구성이 뛰어납니다.
  • 레이저 출력 모니터는 조명 상태를 지속적으로 확인하고 일정한 레이저 출력을 유지하도록 조정합니다.
  • 시스템 관리자는 로그 파일을 보고 서비스 유지보수 일정을 추적할 수 있습니다.

Evident는 신속한 서비스와 기술 지원에 대한 약속을 바탕으로 제품을 지원합니다. Evident는 현미경이 예측 가능한 비용으로 최고의 성능을 발휘할 수 있도록 다양한 지원 계획과 원격 지원 옵션을 제공하므로 문제가 있는 경우 엔지니어나 전문가가 방문할 때까지 기다릴 필요가 없습니다.


NIR 지원 컨포컬 현미경으로 더 많은 정보 발견

시스템의 향상된 기술은 하나의 이미지에서 더 많은 정보를 발견할 수 있도록 확장된 멀티플렉싱을 제공했습니다.

NIR 이미징은 FV4000 시스템의 여기(λ_Ex) 및 검출(λ_Em) 스펙트럼 프로파일을 확장하여 더욱 우수한 멀티플렉싱 기능을 제공합니다. 따라서 중첩되는 방출 신호를 최소화하는 데 도움이 되는 염료를 추가로 사용할 수 있습니다.

  • 업데이트된 TruSpectral™ 기술과 Evident의 고감도 SilVIR™ 검출기를 사용하여 최대 6개 채널 멀티플렉싱
  • 고효율 볼륨 위상 홀로그램(VPH) 회절 격자 및 슬릿을 통해 최소 1nm 단위로 업계 최고 수준의 400nm~900nm 파장 범위 감지 가능
  • 최대 6개 채널의 광대역 또는 적색편이 검출기로 형광색소 선택지를 확대하여 손상을 최소화하고 자가형광을 최소화
  • 모듈식 레이저 결합기가 405nm~785nm 범위의 레이저 라인을 최대 10개까지 동시에 허용 

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6가지 형광색소로 표지된 헬라(HeLa) 세포
세포 핵(DAPI, 파란색), 세포막(AF488, 녹색), 핵공(AF561, 노란색),
미세소관(Qdot605, 자홍색), 미토콘드리아(MitoTracker DeepRed, 청록색), 액틴(AF750 팔로이딘, 회색).

효율적인 NIR 형광 이미징을 위한 고품질 광학 기기

FV4000 시스템의 광학 요소는 알루미늄이 아닌 은으로 코팅된 검류계 및 공진 스캐너를 포함하여 400nm~1300nm 범위의 높은 투과율을 갖습니다.

수상 경력에 빛나는 X Line™ 대물렌즈는 400nm~1000nm 사이의 색수차를 보정합니다. 또한 더 높은 개구수와 탁월한 평탄도를 갖췄을 뿐만 아니라 UV에서 NIR까지의 투과율이 매우 높아 멀티플렉싱 기능이 향상됩니다.

공동 국소화의 신뢰성 향상을 위해 Evident의 특수 A Line™(PLAPON60XOSC2) 오일 침지 대물렌즈(ne~1.40)는 엄격한 공동 국소화 분석을 위해 색수차를 최소화합니다.

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고품질의 컨포컬 이미지를 빠르게 획득

고급 기술을 고유하게 조합하여 사용하면 기존의 레이저 스캐닝 현미경 시스템보다 더 빠르게 고품질의 이미지를 획득할 수 있습니다.

  • 고해상도 이미지를 고속으로 획득: 픽셀당 0.033µs를 지원하는 FN20의 1K × 1K 공진 스캐너와 SilVIR 검출기를 사용하면 최소한의 노이즈로 이미지를 빠르게 획득할 수 있습니다.
  • 탁월한 품질의 매크로 이미지: 뛰어난 품질의 스티칭된 매크로 이미지를 빠르게 획득하여 시간과 연구 잠재력을 극대화할 수 있습니다.

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1K 공진 스캐너를 사용하여 스티칭된 이미지를 생성하는 경우 총 77개의 4채널 XYZ 지점(11 × 7)을 16분 이내에 획득했습니다(검류계 스캐너를 사용하는 경우 2시간이 소요됨). H 라인 마우스 뇌의 관상 단면: 청록색(DAPI, 세포 핵), 녹색(YFP, 뉴런), 노란색(Cy3, 성상세포), 자홍색(AlexaFluor 750, 미세소관). 샘플 제공: Takako Kogure 및 Atsushi Miyawaki, RIKEN CBS 세포 기능 역학부.


간단하고 정확한 초고해상도 이미징

전용 하드웨어 없이 FV4000 현미경을 사용하여 초고해상도 이미지를 캡처합니다.

  • A Line HR 대물렌즈와 초고해상도 소프트웨어(FV-OSR)을 사용하여 세포 내 구조를 손쉽게 관찰
  • FV-OSR은 컨포컬 조리개를 자동으로 최적화하여 고주파 성분을 감지하고 대비를 향상시켜 120nm의 해상도 획득
  • SilVIR 검출기와 실시간 처리 덕분에 이전 세대 시스템보다 8배 빠른 초고해상도 이미지 획득

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두꺼운 샘플의 고해상도 3D 이미지

두꺼운 샘플을 이미징할 때 FV4000 현미경을 사용하면 고해상도 3D 이미지를 캡처할 수 있습니다.

  • SilVIR 검출기의 넓은 동적 범위와 감도를 통해 NIR의 더 긴 파장을 활용하여 깊숙이 침투
  • 멜라닌 및 헴(heme) 등의 광산란 화합물이 700nm~1500nm 사이의 빛을 덜 흡수한다는 점을 활용하여 산란 및 흡수가 더 적은 깊이 있는 이미지 획득 가능
  • FV4000의 685nm, 730nm, 785nm 다이오드 레이저 덕분에 가시 레이저에 비해 훨씬 더 깊이 있는 이미지 획득 가능
  • 높은 개구수의 실리콘 대물렌즈는 구면 수차를 최소화하고 마르지 않는 실리콘 오일로 타임랩스 이미지에 유용
  • 두꺼운 샘플에서 탁월한 3D 이미지를 얻기 위해 TruSight™ 디콘볼루션을 사용하여 전체 이미지 품질과 Z 해상도 개선
  • 특수 cellSens™ 소프트웨어 알고리즘을 사용하여 이미지 획득부터 출판까지 원활한 워크플로 실현
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DAPI(청록색, 세포 핵) 및 AlexaFluor790(자홍색, i-67)로 표지된 헬라 세포 스페로이드. NIR 785nm에서는 스페로이드의 전체 볼륨에 대한 이미징이 가능했지만, 405nm 레이저에서는 표면적 세포 핵 관찰만 가능했습니다.


손상이 적은 생세포의 정확한 역학

일반적으로 형광 여기를 위해 짧은 기간 동안 더 긴 파장을 사용하는 것이 전반적인 샘플 상태에 더 유리합니다. 광독성이 적은 빛을 사용하면 더 오랜 기간 동안 이미징할 수 있으므로 생세포 이미징 실험에서 더욱 일관되고 재현 가능한 데이터를 얻을 수 있습니다.

FV4000 시스템은 685nm, 730nm, 785nm 레이저를 통해 자연스러운 타임랩스 이미징을 제공할 뿐만 아니라 초점 위치를 유지하기 위한 전용 TruFocus Red Z 드리프트 보정기도 갖추고 있습니다. 이 업그레이드된 TruFocus Red 장치는 더 넓은 범위의 파장을 지원하며 고성능 X Line™ 및 A Line™ 시리즈를 포함한 광범위한 대물렌즈와도 호환됩니다


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타임랩스 광 자극: C2C12 세포에서 레이저 손상이 수행되었습니다. 녹색 의사색상은 FM 1-43 항온수조가 적용되었음을 나타냅니다. 이미지는 2μs galvo 스캐너와 UPLSAPO60XOHR 대물렌즈를 사용하여 획득했습니다. 광손상에는 405 nm 레이저가 사용되었고 이미징에는 488nm 레이저가 사용되었습니다. 샘플 제공: Daniel Bittel 및 Jyoti Jaiswal, Children’s National Research Institute의 의학유전연구 센터(Center for Genetic Medicine Research).

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Hoechst33342(핵, 파란색), MitoTracker Green(미토콘드리아, 녹색), LysoTracker Red(리소좀, 노란색), SiR-Tubulin(튜불린, 자홍색), POR-SA-Halo(ER, 청록색)으로 염색된 헬라 세포의 타임랩스 이미지. Hoechst33342: Ex 405nm/Em, MitoTracker Green: LysoTrakcer Red: SiR-Tubulin: POR-SA-Halo: 샘플 제공: Masayasu Taki, Ph.D., 일본 나고야 대학(Nagoya University)의 Institute of Transformative Bio-Molecules(WPI-ITbM), Yuichi Asada 및 Ryusei Aruga, 일본 나고야 대학(Nagoya University) 대학원 이학부.

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MitoTracker Red(미토콘드리아, 자홍색), POR-SA-Halo(ER, 청록색)으로 염색된 타임랩스 이미지(17시간 촬영). MitoTracker Red: Ex 561nm/Em, POR-SA-Halo: Ex 730nm/Em, 샘플 제공: Masayasu Taki, Ph.D., 일본 나고야 대학(Nagoya University)의 Institute of Transformative Bio-Molecules(WPI-ITbM), Yuichi Asada 및 Ryusei Aruga, 일본 나고야 대학(Nagoya University) 대학원 이학부.

선명한 심부 이미지

FV4000 현미경과 함께 Evident의 실리콘 침지 대물렌즈를 사용하면 샘플 내부의 특징과 심부 구조에 대한 선명한 이미지를 얻을 수 있습니다. 실리콘 오일의 굴절률은 생세포나 조직의 굴절률과 유사해 공기, 물, 기타 오일에 비해 구면 수차가 크게 줄어듭니다. 수차가 적기 때문에 샘플의 심부에서 더 선명한 이미지를 얻을 수 있습니다. 그리고 실리콘 침지 오일은 37℃(98.6°F)에서도 마르지 않아 장시간의 타임랩스 이미징에 효과적입니다.


컨포컬 이미징을 한 단계 더 높은 수준으로 끌어올려 데이터 분석 시간을 절약해 보세요. 현미경의 신호 대 잡음비도 매우 우수하지만 TruAI™ 노이즈 제거 기술은 압도적으로 데이터가 풍부한 공명 이미지를 획득하기 위해 노이즈를 더욱 줄일 수 있습니다.

이미지 분석 속도를 높이기 위해 시스템이 자동으로 이미지 데이터를 분할할 수 있도록 AI 모델을 사전에 훈련하면 시간이 많이 걸리는 수동 프로세스의 작업 부하를 크게 줄일 수 있습니다. 그리고 TruAI 기술은 분석을 더욱 간소화하므로 데이터를 빠르게 얻을 수 있습니다.


TruAI 노이즈 감소

TruAI 노이즈 감소 기능을 통합하여 공진 스캐너 이미지 품질을 높일 수 있습니다. 공진 스캐너 이미지는 손상을 최소화하면서 빠르게 세포 역학을 포착하는 데 효과적이지만, 이로 인해 S/N 비율이 저하됩니다. TruAI 노이즈 감소 기능은 SilVIR™ 검출기의 노이즈 패턴을 기반으로 선행 훈련된 신경망을 사용하여 시간 해상도는 그대로 유지하면서 이미지 품질을 개선할 수 있습니다. 이러한 선행 훈련된 TruAI 노이즈 감소 알고리즘은 실시간 처리는 물론 사후 처리에도 사용할 수 있습니다.

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뇌 샘플: DAPI(핵, 청록색), GFAP(성상세포, 녹색/488), MAP2(미세소관 관련 단백질 2, 뉴런 및 수상돌기, 청록색/647), MBP(미엘린 염기성 단백질, 빨간색/568)로 염색된 마우스 뇌의 관상 단면(50μm). 샘플 제공: 샘플 준비 Alexia Ferrand, 샘플 획득 Sara R. Roig 및 Alexia Ferrand. 바젤 대학교(University of Basel) 바이오센터(Biozentrum)의 이미징 코어 시설(maging Core Facility).

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1K 공진 스캐너를 사용하여 획득한, MitoView 720으로 표지된 헬라 세포 미토콘드리아. 최대 광자수는 3광자였습니다.

TruAI 이미지 분할

이미지 분석에는 강도 값 임계값을 기반으로 하는 분할 기술을 사용한 데이터 추출이 필요합니다. 그러나 이렇게 하면 시간이 오래 걸리고 시료 상태에 영향을 줄 수 있습니다.

딥러닝을 활용한 TruAI 이미지 분할은 이미지 처리를 간소화하고 샘플 분산을 최소화하여 보다 정확한 이미지 분석을 지원합니다. 매우 약한 형광 이미지나 간단한 임계값 설정 방법을 사용하여 추출하기 어려운 조직을 분할할 수 있습니다.

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스캐너 검류계 스캐너 64 × 64 ~ 4096 × 4096픽셀, 1μs/픽셀 ~ 1000 μs/픽셀
(일반 이미징)
공진 스캐너 512 × 512픽셀, 1024 × 1024픽셀
(고속 이미징)
시야수(FN) 20
스펙트럼 컨포컬 검출기 검출기 SilVIR 검출기(냉각형 SiPM, 광대역 유형/적색편이 유형)
최대 채널수 6개 채널
스펙트럼 방식 VPH, 검출 가능한 파장 범위 400nm~900nm
레이저 VIS 레이저 405nm, 445nm, 488nm, 514nm, 561nm, 594nm, 640nm
NIR 레이저 685nm, 730nm, 785nm
레이저 출력 모니터 내장형
이미지 높은 동적 범위 광자 계수(1G cps, 16비트)

]]> 임진과학 Tue, 27 Feb 2024 10:00:16 +0900 FVMPE-RS http://olympus119.co.kr/bbs/board.php?bo_table=All_In_One&wr_id=4

고감도, 고해상도 심층 다광자 이미징

FVMPE-RS 다광자 현미경은 고급 기술과 광학 설계를 채택하여 심층 이미징 중에 감도와 해상도를 향상시킵니다.

  • 400nm-1600nm의 넓은 스펙트럼 투과율 창은 단파장 탐지에 영향을 주지 않으면서 근적외선 여기를 효율적으로 제공합니다.
  • 큰 면적 탐지 경로는 더 많은 방출 신호, 특히 큰 각도의 산란 광자를 수집합니다.
  • TruResolution 대물 렌즈는 자동 구면 수차 보정을 제공하여 밝기와 해상도를 높이고, 심층 이미지 스택 내의 모든 평면에 걸쳐 미세한 부분들을 드러냅니다.
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자동 조정 기능(좌측)이 있는 TruResolution 대물 렌즈를 사용하여 촬영한 체내 쥐 뇌(Thy1-YFP-H 쥐, 감각 피질)의 3D 재구성 이미지와 약 600μm 깊이에서 촬영한 최대 투영 이미지. 자동 조정 기능을 사용하지 않고 촬영한 이미지(우측 상단)와 해당 기능을 사용하여 촬영한 이미지(우측 하단).

이미지 촬영 : 리켄 BSI-올림푸스 협력 센터, 이미지 제공 : Hiromu Monai 박사, Hajime Hirase박사와 Atsushi Miyawaki 박사.



빠르고 역동적인 세포 과정에 대한 고속 이미징

고속 공명 스캔 및 고해상도 선형 스캔이 표준 제공됩니다.

  • 초당 30프레임(fps)의 풀 프레임 이미징은 체내 및 라이브 셀 이미징 중에 운동 인공물을 줄입니다.
  • 438fps의 최대 이미징 속도를 통해 혈류 중 세포 이동와 신경 세포 및 기타 세포의 칼슘 신호 전달 이벤트와 같은 빠르고 역동적인 현상을 포착할 수 있습니다.



보다 넓은 스펙트럼 범위에 대한 다중 파장 여기

FVMPE-RS 이미징 플랫폼은 다중 채널, 다광자 여기 이미징을 위해 이중 파장 적외선 펄스 레이저 또는 두 개의 개별 조정 가능한 적외선 레이저를 지원합니다.

  • 레이저를 반복적으로 조정하지 않고도 다양한 형광단을 최적으로 여기
  • 각 레이저 라인에 대한 개별적 전력 제어를 통해 서로 다른 효율성을 가진 형광단을 동시에 쉽게 포착할 수 있습니다.
  • 1000nm 이상의 레이저 파장을 통해 성장하는 적색 편이 형광 염료 및 단백질 라이브러리와 실용적인 3차 하모닉 생성 이미징을 사용할 수 있습니다.

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돼지 지방 조직의 3차 하모닉 생성 이미징. 표지되지 않은 돼지 지방 조직은 1250nm에서 펨토초 레이저로 조사되었고, 2차 하모닉는 625nm로 콜라겐 섬유에서, 3차 하모닉은 416nm로 지질 계면에서 탐지되었습니다.



고급 응용 분야를 위한 옵션 기능

FVMPE-RS 다광자 현미경은 모듈식 플랫폼으로, 연구 요구 사항이 증가하는 것에 맞춰 시스템을 쉽게 업그레이드할 수 있습니다.

다음과 같은 옵션이 있습니다.

  • 광 유전자 및 기타 광 조작 실험을 위한 독립적 스캐너 경로
  • 전리 생리학 실험을 지원하는 아날로그 입력 채널
  • 행동 실험 중 다광자 이미징으로 감각 자극을 조정하는 디지털 TTL 입력/출력 라인

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다광자 관찰에 최적화된 직관적인 소프트웨어

맞춤형 소프트웨어 레이아웃은 보다 많은 유연성을 제공하여 효율성을 높입니다.

  • 실험에 맞게 UI 조정
  • 고급 기능에 빠르게 접근할 수 있도록 필요한 도구만 표시할 수 있습니다.
  • 각 실험에서 촬영 매개 변수를 저장하고, 반복적이고 일관된 이미징을 위해 불러올 수 있습니다.

스펙트럼 불혼화 및 3D 렌더링을 포함한 온라인 분석 및 이미지 처리가 표준 제공됩니다.

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심층 이미징의 해상도 최대화

TruResolution 대물 렌즈를 사용하여 두꺼운 표본 내에서 심층 이미징 중에 더 나은 해상도와 대비를 개선시킬 수 있습니다.

이러한 대물 렌즈에는 정확한 초점 위치를 유지하면서 구면 수차를 동적으로 보정하는 자동 보정환이 장착되어 있습니다. 부피 이미지의 모든 평면에 걸쳐 자동으로 조정하므로 더 선명하고 밝은 3D 이미지를 심도 있게 전달합니다.


자동 레이저 정렬을 통한 사용자 친화적이고 정확한 이미징

파장 조정, 온도 변동 및 기타 캐비티 이동 등으로 인한 레이저 이동은 일반적인 시스템에서 여기 빔의 정렬 불량을 유발할 수 있습니다.

FVMPE-RS 다광자 현미경은 레이저 이동이 발생하는 경우에도 여기 빔을 스캐너 장치에 정확하게 4축 레이저 정렬을 유지하여 하여 시스템 유지 보수를 단순화합니다. 빔 위치와 각도는 더 높은 레이저 출력과 일관된 픽셀 정합을 제공할 수 있도록 자동으로 조정됩니다.

시스템에 두 개의 여기 레이저 라인이 있는 경우, 이 기능은 빔 간의 공동 정렬을 유지하여 채널 간의 공동 정합 오류를 제거합니다.


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초당 최대 438 프레임의 고속 스캔

고속 공진 스캐너와 선형 검류계 스캐너는 단일 시스템에서 고속의 고해상도 이미징을 제공합니다. 전체 시야(시야수 18)에 걸쳐 512×32 픽셀에서 최대 438fps의 포착 속도 또는 512×512 픽셀에서 최대 30fps의 포착 속도를 통해 다음을 수행할 수 있습니다.

  • 동적 샘플을 이미징 시 운동 인공물 방지
  • 혈류에서 빠르게 움직이는 세포 추적
  • 신경 세포 및 다른 세포에서의 빠른 막 전위 역학에 대한 관찰

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효율적인 레이저 전송

은도금 스캐너 반사경은 더 밝은 이미지를 얻기 위해 표본에 더 많은 레이저 전력을 전달하는 데 도움이 됩니다.

기존 알루미늄 코팅 반사경에 비해 근적외선 범위에서 반사율이 높아져 특히 체내 심층 실험에 특히 유리합니다.

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검출기 옵션으로 형광 이미징 성능 극대화

고감도 갈륨 비소 인화물(GaAsP) 광전자 증배관(PMT) 검출기를 사용하여 희미한 형광에서 높은 신호-노이즈 비(SNR) 이미지를 촬영할 수 있습니다. 표준 다중 알칼리(MA) PMT보다 더 높은 양자 효율을 제공하며, 팬이 없는 냉각 기능을 통해 SNR을 더욱 향상시킵니다.

밝게 방출되는 표본으로 작업하는 경우, GaAsP 탐지기의 높은 SNR을 더 넓은 동적 범위의 MA 탐지기와 결합시킬 수 있습니다.

빛의 효율성을 높이기 위해 시스템의 넌디스캔드 탐지 경로는 대면적 광학 장치를 사용하여 산란된 형광 광자를 더 잘 포착하며, 다광자 대물 렌즈의 광범위한 수집 능력을 최대한 활용하는 것이 특징입니다.

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심층 이미징을 위해 설계된 MPE 대물 렌즈

투명 조직에서 최대 8mm 깊이 관찰

Olympus 특수 다광자 대물 렌즈는 넓은 시야를 통해 산란된 형광 광자를 효율적으로 수집하고, 체내 및 체외 표본 깊은 곳에서 더 밝은 이미지를 생성할 수 있습니다.

  • 연구 요건에 따라 다양한 제품군 중에서 대물 렌즈를 선택할 수 있습니다.
  • 다양하게 설계된 광학 제품들은 높은 개구수, 긴 작동 거리, 넓은 시야, 다양한 침지 매체 및 조직 투명제와의 호환성을 지니고 있습니다.
  • 보정환은 굴절률, 커버 슬립 두께, 조직 깊이를 보정합니다.
  • TruResolution 대물 렌즈는 전자동화된 구면 수차 보정을 제공합니다.

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고급 광학 코팅으로 가시광선부터 적외선 투과율까지

당사의 다광자 대물 렌즈와 스캐너 광학 기기에는 400nm에서 1600nm까지 뛰어난 투과율을 제공하는 Olympus 1600 광학 코팅이 적용되어 있습니다.

효율적인 적외선 투과율은 단파장에서의 강력한 지원으로 형광 및 하모닉 방출에 대한 효율적인 수집을 유지하면서 심도 있는 형광 여기에 더 많은 가용 전력을 제공합니다.

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심층 초점 모드로 신호 극대화

심층 초점 모드는 레이저 산란 조건에 따라 레이저 빔의 직경을 조정합니다. 레이저 산란이 심한 체내 표본의 경우 빔이 좁아져 더 많은 여기 광자가 표본 내에서 더 깊숙이 도달하여 더 밝은 이미지가 생성됩니다.

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독립적인 광자 자극 제어

정밀한 마이크초 광자 자극 및 광표백 실험을 위해 다음을 추가할 수 있습니다.

  • 독립 검류계 스캐너 (SIM 스캐너)
  • 가시광선 레이저 모듈

임의 자극 관심 영역(ROI)을 이미징 ROI와 별개로 정의할 수 있습니다. 더 빠른 속도가 필요한 경우, 임의 접근 멀티 포인트 순차 자극을 사용할 수 있습니다.

두 개의 적외선 이미징 라인이 있는 시스템에서 SIM 스캐너는 동시 다광자 자극 및 이미징을 가능하게 합니다.

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전기 생리학 및 광유전학에서의 마이크로세컨드 타이밍

하드웨어 시퀀서는 자극 및 이벤트 트리거를 위한 ​​마이크로초 정밀 타이밍을 제공합니다.

자극은 이미징 스캔과 공간 및 시간적으로 동기화되어 정확한 위치에서 빠른 응답 역학을 쉽게 포착할 수 있습니다. 전기 생리학 및 광유전학의 경우, 이는 동기식과 비동기식 자극 반응을 구별하는 것의 차이를 의미하기도 합니다.

2주 이상 지속되는 촬영 또는 이미징 작업 간 전환이 필요한 복잡한 절차를 사용한 실험의 경우, 시퀀스 관리자 소프트웨어 모듈은 밀리초 정밀도를 유지하여 까다로운 체​​내 및 체외 실험에서 고품질 데이터를 제공합니다.

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전기 생리학적 데이터 및 레이저 광 자극을 아날로그 장치와 동기화

아날로그 입력 및 디지털 TTL I/O를 사용하여 전기 생리학 실험을 지원할 수 있습니다. 아날로그 입력 장치는 외부 전압 신호를 이미지 데이터로 기록합니다. 패치 클램프로 측정된 광 자극 전기 신호는 이미지 포착과 동기화하여 의사 색상 강도 오버레이로 표시할 수 있습니다.

다지점 매핑 고급 소프트웨어(MMASW)는 매핑 스캔을 위해 임의로 선택한 여러 지점 또는 직사각형의 관심 영역(ROI)의 지점에 대해 정밀한 광 자극을 할 수 있게 해줍니다. 패치 클램핑 시스템의 전압 신호를 동시에 기록할 수 있습니다.

  • 다지점 스캔: 이미지에 대한 광 자극을 위한 지점 수를 지정합니다. 각 개별 자극 지점에 대해 서로 다른 레이저 라인을 선택할 수 있습니다.
  • 매핑 스캔: 이 소프트웨어는 인접 지점들이 여기되는 것을 방지하여 대상의 반응을 보다 정확하게 관찰할 수 있습니다.
  • 자극의 타이밍, 지속 기간 및 간격을 마이크로초로 정의하고, 연속 자극 또는 펄스 자극으로 실험을 프로그래밍합니다.
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* ChR2 및 NpHR 혼합 실험을 위해 다중 레이저가 장착된 SIM 스캐너를 사용하여 다중 색상 지점별 레이저 제어가 지원됩니다.

3D 자극 반응 지도 생성

특수 매핑 스캔은 의사 무작위 시퀀스를 사용하여 광학 자극에 대한 전기 생리학적 반응을 측정할 때 보다 정확한 공간 반응 지도를 제공합니다. 칼슘 또는 전압 표시기의 직접 전기 패치 클램프 기록 및 형광 신호를 고해상도 이미지에 중첩하여 표시할 수 있습니다. 강도 임계 값을 사용하여 가장 활동적인 영역의 고속 다지점 스캔을 정의할 수 있습니다. 피에조 Z 드라이브 옵션을 사용하여 3D 반응 지도로 확장시킬 수 있습니다.

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광시야와 고해상도의 결합

다중 영역 타임 랩스(MATL) 기능을 사용하여 전체 표본을 고해상도로 더 넓은 맥락에서 볼 수 있습니다.

  • 이 기능은 전동 스테이지를 사용하여 매우 넓은 시야에서 인접한 여러 이미지를 자동으로 포착하고 연결합니다.
  • 전체를 합성한 시야 영역 또는 인접하지 않은 영역에 대한 타임 랩스를 프로그래밍합니다.
  • 매핑 기능을 사용하여 큰 이미지에서 특정 세포의 위치를 ​​쉽게 찾을 수 있습니다.

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이미지 데이터 제공: Urs Ziegler와 Jose Maria Mateos, 취리히 대학교 현미경 및 이미지 분석 센터 마우스 라인 L15 제공: Pico Caroni, 바젤 FMI


정확한 실험 제어

시퀀스 관리자를 사용하면 실험을 쉽게 조정할 수 있습니다. 다음과 같은 기능들과 함께 정확한 타이밍으로 복잡한 프로토콜을 쉽게 구성하고 신속하게 처리할 수 ​​있습니다.

  • 타임 랩스 중 프레임 속도 변경
  • 다른 여기 파장간 자동 전환
  • 이미지 촬영 중 다른 위치에서 광 자극 이벤트 반복

일관된 실험 실행을 위해 프로토콜을 저장하고 다시 불러올 수 있습니다.

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스펙트럼 디콘볼루션을 사용한 중첩 채널 분리

밀접하게 중첩된 형광 스펙트럼은 여러 표지를 동시에 봐야 하는 생물학적 연구를 복잡하게 만들 수 있습니다. 이제 블라인드 불혼화 알고리즘에 기초한 스펙트럼 디콘볼루션 또는 이전에 저장된 다중 채널 프로필을 사용하여 중첩된 스펙트럼 채널을 분리할 수 있습니다. 실시간 처리를 통해 이미지를 촬영하는 동안 채널간 누화를 제거할 수 있습니다.

일반 모드

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빨간색 및 초록색 형광의 스펙트럼 중첩은 정상적인 촬영 중에 채널간 누화를 유발합니다.

실시간 불혼화 모드

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실시간 불혼화 모드는 이미지 촬영 중에 스펙트럼 디콘볼루션을 적용하여 서로 다른 형광단을 더 잘 분리할 수 있습니다.


3D 렌더링

많은 양의 Z 스택 데이터를 3D 디스플레이로 렌더링할 수 있습니다. 중요한 보기를 키 프레임으로 등록할 수 있어 다양한 카메라 각도로 확대/축소하고 전환하는 3D 이미지의 애니메이션 보기를 쉽게 생성할 수 있습니다.

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텍사스 레드로 표지된 쥐 뇌 혈관의 4mm 3D 스택
이미지 데이터 제공: Hiroshi Hama, Rie Ito, Atsushi Miyawaki, 리켄 뇌 과학 연구소의 세포 기능 역학 연구소


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]]> 임진과학 Tue, 20 Jun 2023 17:55:56 +0900 FV3000 http://olympus119.co.kr/bbs/board.php?bo_table=All_In_One&wr_id=3 자외선에서 NIR까지의 고감도 이미지 멀티플렉싱

FV3000 컨포칼 현미경의 TruSpectral 검출기는 독자적인 스펙트럼 검출 기술로 고감도와 스펙트럼 유연성을 모두 갖추어 형광소가 아무리 희미하더라도 검출해냅니다.

  • TruSpectral 기술은 볼륨 위상 홀로그램(VPH) 회절격자를 적용하여 기존 스펙트럼 검출 기술보다 최대 3배 이상 뛰어난 광투과를 달성합니다.
  • 개별 형광소에 대한 신호 검출을 최적화하기 위해 각기 조정 가능한 채널이 있습니다. 가변 차단 필터 모드는 순차적인 최대 16개의 채널을 통해 동시에 4채널 이미지를 인식합니다.
  • 람다(Lambda) 스캐닝 모드는 복잡하게 겹치는 형광 신호의 정확한 스펙트럼 불혼합을 지원합니다.

신제품인 FV3000 적색 근적외선(NIR) 솔루션은 세밀히 엔지니어링된 NIR 업그레이드 세트를 통해 FV3000 현미경의 파장 검출 기능을 최대 890nm의 NIR 영역으로 더욱 확장합니다.

  • 730nm 또는 785nm 레이저와 NIR 감지 1채널 또는 2채널 GaAs 검출기는 자외선에서 NIR(400nm~890nm)에 이르는 멀티플렉싱 이미징을 6개 채널까지 지원합니다.
  • TruFocus Red는 안정적이고 부드러운 NIR 타임랩스 이미징을 지원합니다.
  • X 라인 대물렌즈는 다색 형광 이미징 중에 뛰어난 색상 정확도를 위해 400nm부터 1000nm까지의 매우 광범위한 색수차 보정 제공
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(a) 신경 아교 섬유 산성 단백질(GFAP, 별아교세포 마커, 노란색), 칼모듈린 의존성 단백질 키나아제 II(CaMKII, 피라미드 신경 마커, 빨간색), 암포테린 유도 단백질 1 전구물질(AMIGO-1, 신경막 마커, 청록색), 파브알부민(PV, 억제성 뉴런 마커, 자주색), 안키린-G(AnkG, 촉삭 돌기 절면 마커, 녹색) 및 nuclear yellow(핵 마커, 파란색)로 표시한 마우스의 mPFC.
이미지 데이터 제공: Stephanie Shiers, Ph.D. (수료생), Theodore J. Price, Ph.D., Price Lab, Eugene McDermott 교수 겸 연구 센터 책임자, 텍사스대학교 댈러스 캠퍼스 행동 및 뇌과학 대학 신경생물학과, 고급 통증 연구 센터.
(b) Hoechst (파란색), anti-IBA1 (Alexa Fluor 488; 초록색), anti-MAP2 (Alexa Fluor 594, 노란색), anti-FOX3/NeuN (Alexa Fluor 647; 빨간색), 및 anti-MBP (Alexa Fluor 750; 청록색)으로 표시한 래트 뇌 박편. 이미지는 GaAsP 및 GaAs 검출기에서 405nm, 488nm, 561nm 및 730nm 레이저 라인이 있는 UPLXAPO10X 대물렌즈로 인식했습니다. TruSight 디콘볼루션 처리를 통해 Z에 최대 강도 투시함.
샘플 제공: EnCor Biotechnology.



매크로-마이크로 이미징 및 초고해상도 현미경

FV3000 현미경의 매크로-마이크로 워크플로는 데이터 인식을 위한 로드맵을 제공하므로 사용자는 상황에 맞는 데이터를 보고 고해상도 이미징을 위해 대상 영역을 쉽게 찾을 수 있습니다.

  • 1.25배 또는 2배의 저배율 대물렌즈를 사용하여 전체 표본의 넓은 관측 시야(FOV) 맵을 빠르게 캡처
  • 중첩 맵에서 관대상 영역을 식별한 후 Olympus Super Resolution 기술(FV-OSR)을 사용해 120nm까지의 고해상도 공초점 이미징을 위해 더 높은 배율 대물렌즈로 전환
  • 인식을 완료하고 TruSight 이미지 처리로 출판 준비가 된 현미경 이미지를 인식
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GFP(Alexa Fluor 488, 녹색), SV2(Alexa Fluor 565, 빨간색), Homer(Alexa Fluor 647, 파란색)에 대한 이차 항체로 표지한 팽창 현미경(사전 팽창)용으로 끼워 넣은 마우스의 뇌 편측절단.
샘플 제공: Dr. Ed Boyden 및 Dr. Fei Chen, MIT.
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수상돌기(anti-GFP Alexa Fluor 488, 녹색) 및 시냅스 마커(SV2, Alexa Fluor 565, 빨간색). cellSens 고급 제한 반복 디콘볼루션으로 처리된 Olympus Super Resolution 이미지. 평균 전체 너비 절반 최대 측정 135nm. 100배율 1.35 개구수 실리콘 대물렌즈로 인식한 이미지.
샘플 제공: Dr. Ed Boyden 및 Dr. Fei Chen, MIT.

고속 이미징과 생산성 향상을 위한 하이브리드 스캐닝

FV3000 하이브리드 스캐너는 하나의 기기에 두 개의 스캐너를 제공하여 공초점 이미징 기능을 향상합니다.

  • FV3000RS 하이브리드 스캔 장치는 정밀 스캔에 적합한 검류계 스캐너와 실시간 생리학적 현상의 고속 이미징에 적합한 공명 스캐너 사용
  • FN 18의 30fps(초당 프레임)부터 클립 스캔을 사용한 438fps까지의 속도를 제공하는 공진 스캐너를 통해 넓은 FOV로 비디오 속도의 이미지 캡처
  • 공진 스캐너를 사용하여 심장 박동, 혈류, 세포 내부의 칼슘 이온(Ca2+) 역학 관계 같은 빠른 현상을 관찰
  • 버튼 하나를 클릭하는 것만으로 검류계 스캐너와 공진 스캐너 간에 전환 가능

정확한 타임랩스 이미징

타임랩스 실험을 하려면 초점이 일관되어야 하고 샘플에 대한 광독성이 낮아야 합니다.

  • Olympus의 TruFocus 장치는 온도 변화나 시약 추가에도 불구하고 생세포 이미징 중에 초점을 유지하도록 기여
  • FV3000 현미경의 고감도 검출기에는 레이저 출력이 훨씬 적게 필요하지만, 공진 스캐너는 레이저 조명 시간을 줄여 광독성을 낮추기 때문에 생리학적으로 더 정확한 공초점 이미징 데이터 인식 가능


실리콘 대물렌즈를 사용한 심층 조직 관찰

실리콘 오일의 굴절률은 생체 조직의 굴절률에 가깝기 때문에 구면 수차를 최소화하면서 조직 내부를 고해상도로 관찰할 수 있습니다.

  • 굴절률 일치를 통해 이상적인 초점 부피를 제공하여 완벽한 부피 재구성과 큰 생물에 대한 고해상도 공초점 이미징 실현
  • 긴 작동 거리 덕분에 심층적으로 미세한 현미경 이미징 가능
  • 3D 재구성 소프트웨어를 사용하여 도출되는 데이터를 실시간으로 확인하고 구조를 쉽게 관찰


자동 오가노이드 이미징

표적 개체 찾기부터 고해상도 3D 이미지 캡처까지, 오가노이드 이미징 워크플로는 시간이 오래 소요될 수 있습니다. 특히 마이크로플레이트에서 여러 웰을 이미징할 때 시간이 오래 걸립니다. FV3000 시스템용 매크로-마이크로 모듈은 오가노이드 이미징 워크플로를 자동화하여 이미징 효율성을 극적으로 높이는 스마트 솔루션입니다.

FV3000 현미경에서 낮은 배율로 이미지를 캡처한 후, 매크로-마이크로 소프트웨어 모듈에서 용기나 웰의 관심 개체를 자동으로 찾아 높은 배율로 캡처할 수 있습니다. 자동화된 이 프로세스는 사용자가 현미경을 작동하는 데 쓰는 시간을 극적으로 줄여줍니다.


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TruSpectral 탐지

획기적인 TruSpectral 탐지 기술은 이전 세대의 스펙트럼 탐지 장치에 비해 뛰어난 결과를 제공합니다. FV3000 현미경의 모든 채널에 적용된 TruSpectral 탐지 기술은 스펙트럼 탐지기의 유연성과 필터 기반 탐지기의 감도를 결합합니다.


Truspectral 탐지 기술이 작동하는 방식

Truspectal 탐지는 높은 효율성을 위해 특허 받은 VPH(Volume Phase Hologram) 전송을 기반으로, 조절식 슬릿을 사용하여 각 개별 채널의 탐지 파장을 2nm로 선택합니다.



감도 및 정확도

모든 FV3000 컨포칼 현미경에 통합된 TruSpectral 탐지 기술은 기존 스펙트럼 탐지 장치에 비해 훨씬 높은 광 처리량을 지닙니다. 볼륨형 위상 홀로그램은 반사 격자에 비해 전송 효율이 최대 3배 높아 빛을 분산시킵니다. 따라서 생체 조직과 고정된 조직에 대한 우수한 다중 색상 형광 현미경 이미지를 생성할 수 있습니다.

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향상된 양자 효율성

FV3000 현미경의 HSD(고감도 탐지기)를 사용하면 기존 탐지기로는 볼 수 없을 정도로 방출량이 약한 표본을 볼 수 있습니다. HSD 장치는 최대 양자효율이 45%인 2개의 GaASP 채널과 매우 낮은 여기광 하에서 높은 신호-노이즈 비를 갖는 이미지에 대해 노이즈를 20% 감소시키는 펠티에 냉각 기술을 통합시켰습니다. HSD 장치를 FV3000 시스템에 결합하면 4채널 GaAsP 이미징이 가능합니다.

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16채널의 불혼화가 탑재된 다중 채널 Truspectral 탐지

TruSpectral 탐지는 모든 현미경 채널에서 독립적으로 작동하여 최대 4개 채널에서 진정한 동시 다중 채널 람다 스캔을 가능하게 합니다. 다중 채널 람다 모드는 우수한 스펙트럼 분리 결과를 얻을 수 있도록 실시간 및 후처리 스펙트럼 불혼화를 용이하게 해줍니다. 최대 4개의 동적 범위를 통해 각 탐지기의 감도를 개별적으로 조정하여 밝고 희미한 신호를 최적으로 분리시킬 수 있습니다.

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스펙트럼 불혼화

FV3000 시스템의 스펙트럼 디콘볼루션 알고리즘은 람다 스택 이미지의 스펙트럼 정보를 기반으로 중첩 스펙트럼을 분리할 수 있게 해줍니다. 채널 간 형광 누화는 실시간 이미지 촬영 및 후처리 과정 모두에서 불혼화 알고리즘으로 제거할 수 있으므로 최대 16개의 형광단을 깨끗하게 분리할 수 있습니다.

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다중 채널 람다 스택 이미지를 사용하여 Yoyo-1, 알렉사 형광 488, 로다민-팔로이딘 및 Mitotracker Red로 표지된 PTK2 세포의 스펙트럼 불혼화.


두 가지 스캐너 옵션

기존의 검류계 스캐너(FV3000) 또는 하이브리드 검류계/공진 스캐너(FV3000RS)의 두 가지 스캔 장치 중 하나를 선택합니다.

  • 검류계 스캐너와 Olympus 초고해상도 기술(FV-OSR)을 이용하여 신호-노이즈 비가 높은 120nm까지 분해능이 가능합니다. 
  • 검류계 장치는 정밀한 토네이도 스캔과 전환 시간 100ms의 멀티 포인트 자극을 포함한 유연한 스캔 옵션을 제공합니다.
  • 하이브리드 스캔 장치는 고정밀 스캔을 위한 검류계 스캐너와 고속 촬영을 위한 공명 스캐너를 모두 갖추고 있습니다. 
  • 공진 스캐너는 512×512 픽셀의 전체 시야로 초당 30 프레임 또는 Y에서 잘라내어 최대 438 프레임으로 칼슘 이온 유속과 같은 중요한 실시간 생리학적 이벤트를 포착할 수 있습니다.


속도와 시야를 절충하지 않았습니다

많은 고속 스캔 방법은 시야를 제한하여 여러 세포로 넓은 영역을 검사할 수 있는 능력이 제한됩니다. FV3000RS 현미경의 공명 스캐너는 초당 30프레임의 비디오 속도로도 18의 시야수를 통해 전체 1배 시야를 유지합니다. Y축을 절단하면 초당 최대 438 프레임의 속도가 가능합니다.


이동 평균 처리

광독성을 방지하기 위해 낮은 레이저 출력에서의 ​​고속 스캔은 신호-노이즈 비를 감소시켜 고해상도 타임 랩스 이미지를 얻기 어려운 경우가 많습니다. 이동 평균 처리 기능을 사용하면 시간 척도를 유지하고, 원본 데이터를 유지하면서 고속의(high-speed) 타임 랩스 이미지를 유연하게 조정할 수 있습니다.

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(왼쪽) 낮은 레이저 출력(0.05 %, 488nm)에서 촬영된 미가공 30fps 데이터. 
(오른쪽) 낮은 레이저 출력에서 ​​촬영된 30fps 데이터에 대한 이동 평균 처리(10 프레임).


매크로-마이크로 관찰

매크로-마이크로 관찰에 관한 데이터를 참조하십시오. FV3000 시스템의 재설계된 광경로를 통해 1.25배의 저배율로 자세한 개요 이미지를 생성한 다음 고배율에서 이미지를 통해 구조를 쉽게 식별할 수 있습니다. 모자이크 이미징을 통해 인접한 시야 영역에 대한 연속 3D(XYZ) 및 4D(XYZT) 이미지를 촬영할 수 있습니다. 이미지 촬영부터 연결에 이르는 전체 프로세스를 전자동화하여 연결 기능을 통해 시간을 절약하고 보다 의미 있는 데이터를 생성할 수 있습니다.

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TruSight 디콘볼루션: 고해상도 이미지 처리

TruSight 디콘볼루션으로 흐림을 제거하고, 보다 선명한 이미지를 얻을 수 있습니다. FV3000 컨포칼 현미경용 특수 cellSens 알고리즘은 버튼 클릭 한 번으로 촬영부터 게시에 이르기까지 완벽한 워크플로를 가능하게 해줍니다. GPU 처리를 활용하여 훨씬 더 빠른 결과를 얻을 수 있습니다.

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최대 4개의 동시 채널을 탑재할 수 있는 Olympus 초고해상도(FV-OSR) 기술

공동 국소화 분석에 적합한 Olympus 초고해상도 이미징 모듈은 약 120nm의 분해능으로 순차적으로 또는 동시에 4개의 형광 신호를 촬영할 수 있으며, 이는 일반적인 컨포칼 현미경의 거의 두 배에 달합니다.

  • 특별한 형광단이 필요하지 않으며, 다양한 표본과 함께 사용 가능
  • 최소한의 교육만으로 사용 가능
  • FV3000 컨포칼 현미경 시스템에 FV-OSR을 추가하여 초고해상도 현미경 구현

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TruFocus 타임 랩스

TruFocus 기술은 다중 위치 실험과 장시간의 타임 랩스를 보다 강력하고 신뢰할 수 있게 해줍니다. TruFocus 기술은 최소 광독성 적외선 레이저(1등급)를 사용하여 표면 평면의 위치 식별과 초점 유지를 위한 두 가지 모드를 제공합니다.

  • 싱글샷 자동 초점(AF) 모드를 사용하면 여러 초점 위치를 설정할 수 있어 다중 위치 실험에서 효율적인 Z 스택 수집이 가능합니다.
  • 연속 AF 모드는 지속적으로 작동하여 원하는 관찰 평면의 초점을 유지하므로 온도 변화 또는 시약 추가로 인한 초점 흐름을 방지하여 타임 랩스 측정에 이상적입니다.
  • TruFocus는 배율 대물 렌즈, 플라스틱 용기 및 실리콘 대물 렌즈를 포함한 다양한 컨포칼 이미징 조건과 호환됩니다.



X 제품군 대물 렌즈가 탑재된 고성능 현미경 이미징

광범위한 색수차 보정, 균일한 이미지 및 높은 수치의 개구수를 제공하는 X 제품군 대물 렌즈는 FV3000 컨포칼 현미경의 이미지 품질을 향상시킵니다. 

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실리콘 이멀젼 대물 렌즈를 이용한 심층 조직 관찰

Olympus는 라이브 셀 이미징에 우수한 성능을 제공하는 높은 개구수의 네 가지 실리콘 이멀젼 대물 렌즈를 제공합니다.

  • 실리콘 오일의 굴절률(ne≈1.40)은 살아있는 조직의 굴절률(ne≈1.38)에 가까우므로 최소 구면 수차로 살아있는 조직 내 심도 있는 관찰을 가능하게 합니다.
  • 실리콘 오일은 마르지 않거나 굳지 않으므로 장시간 관찰 시 오일을 보충할 필요가 없습니다.

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낮은 색수차의 대물 렌즈(PLAPON60XOSC2)를 사용하여 공동 국소화 분석에 대한 신뢰성 향상

이 오일 이멀젼 대물 렌즈는 405-650nm 스펙트럼에서 횡방향 및 축방향 색수차를 최소화하여 신뢰할 수 있는 공동 국소화 이미지를 촬영하고 정확한 위치로 개체를 측정할 수 있게 해줍니다. 또한 이 대물 렌즈는 근적외선(최대 850nm)을 통한 색수차를 보정하여 정량적 현미경 이미징에 이상적입니다.

  • 배율: 60X
  • 개구수: 1.4(오일 이멀젼) 
  • 작동 거리: 0.12mm 
  • 색수차 보상 범위: 405–650nm 
  • 각 대물 렌즈에 맞게 제공되는 광학 데이터

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전기 생리학 실험에 최적화된 구성

트리거 신호 I/O 인터페이스 박스를 통해 컨포칼 이미징 이벤트를 전기 생리학 장비와 동기화 I/O 인터페이스 박스는 또한 전압 신호를 형광 이미지와 동일한 방식으로 처리할 수 있는 이미지로 변환합니다. 이를 통해 컨포칼 스캐너로 광 자극과 동시에 전압 기반 이미지를 포착할 수 있습니다.

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직관적인 소프트웨어

FV3000 소프트웨어는 획득에서 분석에 이르기까지 전체 컨포칼 이미징 워크플로를 간소화시킵니다. 맞춤형의 저장 가능한 레이아웃을 사용하여 복잡한 정도에 관계없이 워크플로 및 실험 요건에 인터페이스를 쉽게 조정할 수 있습니다.

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실시간 3D 렌더링

FV3000 소프트웨어의 실시간 3D 이미지 디스플레이 기능으로 실시간으로 데이터 전개를 확인할 수 있습니다. 이미지 촬영 과정에서 3D 이미지가 구축되어 실시간 이미지로 나타납니다.

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HT29 세포주의 Fucci 유도 스페로이드
이미지 데이터 제공: Yuji Mishima 박사, Kiyohiko Hatake M.D. 박사 임상 화학 요법, 암 화학 요법 센터, 일본 암 연구 재단.


다중 영역 및 마이크로플레이트 타임 랩스

다중 영역 타임 랩스(MATL) 모듈은 전동 스테이지 이동을 정밀하게 제어하여 견고하고 정확한 타임 랩스 데이터를 제공하므로 상세한 개요 현미경 이미지를 생성하여 상황에 맞는 데이터를 볼 수 있습니다. MATL 모듈을 웰 탐색기 모듈과 함께 광범위한 세포 배양 용기 및 맞춤형 마이크로플레이트에 대한 정교하고 직관적인 제어로 더 많은 기능을 이용할 수 있습니다.

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시퀀스 관리자를 통해 복잡성 감소

시퀀스 관리자 소프트웨어 모듈은 복잡한 프로토콜을 쉽게 처리합니다. 수일 간의 타임 랩스 실험은 마이크로초 스캔 정확도와 밀리초 시퀀스 실행 정확도로 제어됩니다. 다음과 같은 다양하고 복잡한 프로토콜을 수행할 수 있습니다.

  • 고배율과 저배율 간 전환
  • 가변 구간 타임 랩스 실험
  • FRAP 또는 FRET을 통한 이미징 간 광 자극(수용체 광표백)

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정량적 현미경 이미지 분석

FV3000 컨포칼 현미경은 일련의 선택적 분석 기능을 통합하여 이미징 워크플로를 완성하고 정량적 데이터를 제공합니다.

  • 계산 및 측정: 세포 세그먼트의 수, 크기, 광도 및 형태 계산 
  • 공동 국소화: 중첩된 형광 스펙트럼 분석

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계수 및 측정
표본 제공: Hidetaka Kosako, 도쿠시마 대학교 후지이 기념 의학 연구소


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공동 국소화


FRET 및 FRAP 실험

cellSens 생명 과학 분석 모듈과 함께 FV3000 현미경을 사용하여 FRET 및 FRAP 실험에서 쉽게 촬영하고 분석할 수 있습니다.

  • FRAP: 표백 후 형광 회복에 의한 광도 변화 곡선을 맞추어 τ/2 및 이동/불변 비율을 추정합니다.
  • FRET: 수용체 광 표백, 비율 이미징 및 감응 방출을 통해 FRET 효율성을 측정합니다.

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FRET 분석 예제(수용체 광 표백)


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FRAP 분석 예제



비율 이미징 및 강도 변조 디스플레이(IMD)

FV3000 현미경의 비율 이미징 분석 소프트웨어에는 표준 및 고속 촬영 시 정량적 형광 비율 변화를 표시하는 강도 변조 디스플레이(IMD) 기능이 포함되어 있습니다. 이 기능은 순수 비율 디스플레이가 배경 영역에서 대비가 낮은 칼슘 및 FRET 이미징에 특히 유용합니다.

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tsGFP1-mito는 Hela 세포에서 미토콘드리아 열 발생의 이질성을 나타냅니다.
37°C(98.6°F)에서 CCCP 처리 전후에 tsGFP1-mito 발현 세포의 비율(ex 405nm/ex 488nm) 이미지. 눈금 막대는 10μm(전체 이미지) 및 3μm(부분 이미지)를 나타냅니다.
이미지 데이터 제공: Shigeki Kiyonaka 박사, Yasuo Mori 박사, 분자생물학 분야, 교토 대학교 합성 화학 및 생물 화학과


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심근 세포
이미지 데이터 제공: Yusuke Niino와 Atsushi Miyawaki, 리켄 뇌과학 연구소 세포 기능 역학 연구소



개체 추적

cellSens 개체 추적 모듈을 사용하여 타임 랩스 이미지에서 움직이는 개체를 자동으로 탐지, 추적 및 분석할 수 있습니다. 추적 기능은 셀 이동 및 분열과 같은 동적 프로세스를 정량화할 수 있는 강력하고 직관적인 도구입니다.

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안정적으로 이식된 ES 세포인 Bmal1:luc에서 12일째 RA 유도 분화 세포의 생체 발광
이미지 데이터 제공: Kazuhiro Yagita, M.D. 박사 교토 현립 의과 대학교 생리학 및 시스템 생명 과학과
참고문헌: Proc Natl Acad Sci U S A. 107(8): 3846–3851(2010)


원격 개발 키트(RDK) 모듈

원격 개발 키트를 사용하여 Python, C++ 및 Matlab과 같은 언어로 FV3000 현미경의 특정 기능을 원격 제어하고 프로그래밍할 수 있습니다. RDK 모듈은 프로그래밍 경험이 있는 사용자가 시스템이 더 큰 잠재력을 발휘할 수 있게 해주는 강력한 도구입니다.

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]]> 임진과학 Tue, 20 Jun 2023 16:57:01 +0900