고속 이미징과 생산성 향상을 위한 하이브리드 스캐닝

FV3000 하이브리드 스캐너는 하나의 기기에 두 개의 스캐너를 제공하여 공초점 이미징 기능을 향상합니다.

• FV3000RS 하이브리드 스캔 장치는 정밀 스캔에 적합한 검류계 스캐너와 실시간 생리학적 현상의 고속 이미징에 적합한 공명 스캐너 사용
• FN 18의 30fps(초당 프레임)부터 클립 스캔을 사용한 438fps까지의 속도를 제공하는 공진 스캐너를 통해 넓은 FOV로 비디오 속도의 이미지 캡처
• 공진 스캐너를 사용하여 심장 박동, 혈류, 세포 내부의 칼슘 이온(Ca2+) 역학 관계 같은 빠른 현상을 관찰
• 버튼 하나를 클릭하는 것만으로 검류계 스캐너와 공진 스캐너 간에 전환 가능

정확한 타임랩스 이미징

타임랩스 실험을 하려면 초점이 일관되어야 하고 샘플에 대한 광독성이 낮아야 합니다.

• Olympus의 TruFocus 장치는 온도 변화나 시약 추가에도 불구하고 생세포 이미징 중에 초점을 유지하도록 기여
• FV3000 현미경의 고감도 검출기에는 레이저 출력이 훨씬 적게 필요하지만, 공진 스캐너는 레이저 조명 시간을 줄여 광독성을 낮추기 때문에 생리학적으로 더 정확한 공초점 이미징 데이터 인식 가능

자동 오가노이드 이미징

표적 개체 찾기부터 고해상도 3D 이미지 캡처까지, 오가노이드 이미징 워크플로는 시간이 오래 소요될 수 있습니다. 특히 마이크로플레이트에서 여러 웰을 이미징할 때 시간이 오래 걸립니다. FV3000 시스템용 매크로-마이크로 모듈은 오가노이드 이미징 워크플로를 자동화하여 이미징 효율성을 극적으로 높이는 스마트 솔루션입니다.

FV3000 현미경에서 낮은 배율로 이미지를 캡처한 후, 매크로-마이크로 소프트웨어 모듈에서 용기나 웰의 관심 개체를 자동으로 찾아 높은 배율로 캡처할 수 있습니다. 자동화된 이 프로세스는 사용자가 현미경을 작동하는 데 쓰는 시간을 극적으로 줄여줍니다.

TruSpectral 탐지

획기적인 TruSpectral 탐지 기술은 이전 세대의 스펙트럼 탐지 장치에 비해 뛰어난 결과를 제공합니다. FV3000 현미경의 모든 채널에 적용된 TruSpectral 탐지 기술은 스펙트럼 탐지기의 유연성과 필터 기반 탐지기의 감도를 결합합니다.

Truspectral 탐지 기술이 작동하는 방식

Truspectal 탐지는 높은 효율성을 위해 특허 받은 VPH(Volume Phase Hologram) 전송을 기반으로, 조절식 슬릿을 사용하여 각 개별 채널의 탐지 파장을 2nm로 선택합니다.

감도 및 정확도

모든 FV3000 컨포칼 현미경에 통합된 TruSpectral 탐지 기술은 기존 스펙트럼 탐지 장치에 비해 훨씬 높은 광 처리량을 지닙니다. 볼륨형 위상 홀로그램은 반사 격자에 비해 전송 효율이 최대 3배 높아 빛을 분산시킵니다. 따라서 생체 조직과 고정된 조직에 대한 우수한 다중 색상 형광 현미경 이미지를 생성할 수 있습니다.

향상된 양자 효율성

FV3000 현미경의 HSD(고감도 탐지기)를 사용하면 기존 탐지기로는 볼 수 없을 정도로 방출량이 약한 표본을 볼 수 있습니다. HSD 장치는 최대 양자효율이 45%인 2개의 GaASP 채널과 매우 낮은 여기광 하에서 높은 신호-노이즈 비를 갖는 이미지에 대해 노이즈를 20% 감소시키는 펠티에 냉각 기술을 통합시켰습니다. HSD 장치를 FV3000 시스템에 결합하면 4채널 GaAsP 이미징이 가능합니다.

16채널의 불혼화가 탑재된 다중 채널 Truspectral 탐지

TruSpectral 탐지는 모든 현미경 채널에서 독립적으로 작동하여 최대 4개 채널에서 진정한 동시 다중 채널 람다 스캔을 가능하게 합니다. 다중 채널 람다 모드는 우수한 스펙트럼 분리 결과를 얻을 수 있도록 실시간 및 후처리 스펙트럼 불혼화를 용이하게 해줍니다. 최대 4개의 동적 범위를 통해 각 탐지기의 감도를 개별적으로 조정하여 밝고 희미한 신호를 최적으로 분리시킬 수 있습니다.

스펙트럼 불혼화

FV3000 시스템의 스펙트럼 디콘볼루션 알고리즘은 람다 스택 이미지의 스펙트럼 정보를 기반으로 중첩 스펙트럼을 분리할 수 있게 해줍니다. 채널 간 형광 누화는 실시간 이미지 촬영 및 후처리 과정 모두에서 불혼화 알고리즘으로 제거할 수 있으므로 최대 16개의 형광단을 깨끗하게 분리할 수 있습니다.

두 가지 스캐너 옵션

기존의 검류계 스캐너(FV3000) 또는 하이브리드 검류계/공진 스캐너(FV3000RS)의 두 가지 스캔 장치 중 하나를 선택합니다.

• 검류계 스캐너와 Olympus 초고해상도 기술(FV-OSR)을 이용하여 신호-노이즈 비가 높은 120nm까지 분해능이 가능합니다. 
• 검류계 장치는 정밀한 토네이도 스캔과 전환 시간 100ms의 멀티 포인트 자극을 포함한 유연한 스캔 옵션을 제공합니다.
• 하이브리드 스캔 장치는 고정밀 스캔을 위한 검류계 스캐너와 고속 촬영을 위한 공명 스캐너를 모두 갖추고 있습니다. 
• 공진 스캐너는 512×512 픽셀의 전체 시야로 초당 30 프레임 또는 Y에서 잘라내어 최대 438 프레임으로 칼슘 이온 유속과 같은 중요한 실시간 생리학적 이벤트를 포착할 수 있습니다.

속도와 시야를 절충하지 않았습니다

많은 고속 스캔 방법은 시야를 제한하여 여러 세포로 넓은 영역을 검사할 수 있는 능력이 제한됩니다. FV3000RS 현미경의 공명 스캐너는 초당 30프레임의 비디오 속도로도 18의 시야수를 통해 전체 1배 시야를 유지합니다. Y축을 절단하면 초당 최대 438 프레임의 속도가 가능합니다.

이동 평균 처리

광독성을 방지하기 위해 낮은 레이저 출력에서의 ​​고속 스캔은 신호-노이즈 비를 감소시켜 고해상도 타임 랩스 이미지를 얻기 어려운 경우가 많습니다. 이동 평균 처리 기능을 사용하면 시간 척도를 유지하고, 원본 데이터를 유지하면서 고속의(high-speed) 타임 랩스 이미지를 유연하게 조정할 수 있습니다.

매크로-마이크로 관찰

매크로-마이크로 관찰에 관한 데이터를 참조하십시오. FV3000 시스템의 재설계된 광경로를 통해 1.25배의 저배율로 자세한 개요 이미지를 생성한 다음 고배율에서 이미지를 통해 구조를 쉽게 식별할 수 있습니다. 모자이크 이미징을 통해 인접한 시야 영역에 대한 연속 3D(XYZ) 및 4D(XYZT) 이미지를 촬영할 수 있습니다. 이미지 촬영부터 연결에 이르는 전체 프로세스를 전자동화하여 연결 기능을 통해 시간을 절약하고 보다 의미 있는 데이터를 생성할 수 있습니다.

TruSight 디콘볼루션: 고해상도 이미지 처리

TruSight 디콘볼루션으로 흐림을 제거하고, 보다 선명한 이미지를 얻을 수 있습니다. FV3000 컨포칼 현미경용 특수 cellSens 알고리즘은 버튼 클릭 한 번으로 촬영부터 게시에 이르기까지 완벽한 워크플로를 가능하게 해줍니다. GPU 처리를 활용하여 훨씬 더 빠른 결과를 얻을 수 있습니다.

최대 4개의 동시 채널을 탑재할 수 있는 Olympus 초고해상도(FV-OSR) 기술

TruFocus 타임 랩스

TruFocus 기술은 다중 위치 실험과 장시간의 타임 랩스를 보다 강력하고 신뢰할 수 있게 해줍니다. TruFocus 기술은 최소 광독성 적외선 레이저(1등급)를 사용하여 표면 평면의 위치 식별과 초점 유지를 위한 두 가지 모드를 제공합니다.

• 싱글샷 자동 초점(AF) 모드를 사용하면 여러 초점 위치를 설정할 수 있어 다중 위치 실험에서 효율적인 Z 스택 수집이 가능합니다.
• 연속 AF 모드는 지속적으로 작동하여 원하는 관찰 평면의 초점을 유지하므로 온도 변화 또는 시약 추가로 인한 초점 흐름을 방지하여 타임 랩스 측정에 이상적입니다.
• TruFocus는 배율 대물 렌즈, 플라스틱 용기 및 실리콘 대물 렌즈를 포함한 다양한 컨포칼 이미징 조건과 호환됩니다.

X 제품군 대물 렌즈가 탑재된 고성능 현미경 이미징

광범위한 색수차 보정, 균일한 이미지 및 높은 수치의 개구수를 제공하는 X 제품군 대물 렌즈는 FV3000 컨포칼 현미경의 이미지 품질을 향상시킵니다. 

실리콘 이멀젼 대물 렌즈를 이용한 심층 조직 관찰

Olympus는 라이브 셀 이미징에 우수한 성능을 제공하는 높은 개구수의 네 가지 실리콘 이멀젼 대물 렌즈를 제공합니다.

• 실리콘 오일의 굴절률(ne≈1.40)은 살아있는 조직의 굴절률(ne≈1.38)에 가까우므로 최소 구면 수차로 살아있는 조직 내 심도 있는 관찰을 가능하게 합니다.
• 실리콘 오일은 마르지 않거나 굳지 않으므로 장시간 관찰 시 오일을 보충할 필요가 없습니다.

낮은 색수차의 대물 렌즈(PLAPON60XOSC2)를 사용하여 공동 국소화 분석에 대한 신뢰성 향상

전기 생리학 실험에 최적화된 구성

트리거 신호 I/O 인터페이스 박스를 통해 컨포칼 이미징 이벤트를 전기 생리학 장비와 동기화 I/O 인터페이스 박스는 또한 전압 신호를 형광 이미지와 동일한 방식으로 처리할 수 있는 이미지로 변환합니다. 이를 통해 컨포칼 스캐너로 광 자극과 동시에 전압 기반 이미지를 포착할 수 있습니다.

직관적인 소프트웨어

FV3000 소프트웨어는 획득에서 분석에 이르기까지 전체 컨포칼 이미징 워크플로를 간소화시킵니다. 맞춤형의 저장 가능한 레이아웃을 사용하여 복잡한 정도에 관계없이 워크플로 및 실험 요건에 인터페이스를 쉽게 조정할 수 있습니다.

실시간 3D 렌더링

FV3000 소프트웨어의 실시간 3D 이미지 디스플레이 기능으로 실시간으로 데이터 전개를 확인할 수 있습니다. 이미지 촬영 과정에서 3D 이미지가 구축되어 실시간 이미지로 나타납니다.

HT29 세포주의 Fucci 유도 스페로이드
이미지 데이터 제공: Yuji Mishima 박사, Kiyohiko Hatake M.D. 박사 임상 화학 요법, 암 화학 요법 센터, 일본 암 연구 재단.

다중 영역 및 마이크로플레이트 타임 랩스

다중 영역 타임 랩스(MATL) 모듈은 전동 스테이지 이동을 정밀하게 제어하여 견고하고 정확한 타임 랩스 데이터를 제공하므로 상세한 개요 현미경 이미지를 생성하여 상황에 맞는 데이터를 볼 수 있습니다. MATL 모듈을 웰 탐색기 모듈과 함께 광범위한 세포 배양 용기 및 맞춤형 마이크로플레이트에 대한 정교하고 직관적인 제어로 더 많은 기능을 이용할 수 있습니다.

시퀀스 관리자를 통해 복잡성 감소

시퀀스 관리자 소프트웨어 모듈은 복잡한 프로토콜을 쉽게 처리합니다. 수일 간의 타임 랩스 실험은 마이크로초 스캔 정확도와 밀리초 시퀀스 실행 정확도로 제어됩니다. 다음과 같은 다양하고 복잡한 프로토콜을 수행할 수 있습니다.

• 고배율과 저배율 간 전환
• 가변 구간 타임 랩스 실험
• FRAP 또는 FRET을 통한 이미징 간 광 자극(수용체 광표백)

정량적 현미경 이미지 분석

FV3000 컨포칼 현미경은 일련의 선택적 분석 기능을 통합하여 이미징 워크플로를 완성하고 정량적 데이터를 제공합니다.

• 계산 및 측정: 세포 세그먼트의 수, 크기, 광도 및 형태 계산 
• 공동 국소화: 중첩된 형광 스펙트럼 분석

FRET 및 FRAP 실험

cellSens 생명 과학 분석 모듈과 함께 FV3000 현미경을 사용하여 FRET 및 FRAP 실험에서 쉽게 촬영하고 분석할 수 있습니다.

• FRAP: 표백 후 형광 회복에 의한 광도 변화 곡선을 맞추어 τ/2 및 이동/불변 비율을 추정합니다.
• FRET: 수용체 광 표백, 비율 이미징 및 감응 방출을 통해 FRET 효율성을 측정합니다.

비율 이미징 및 강도 변조 디스플레이(IMD)

개체 추적

cellSens 개체 추적 모듈을 사용하여 타임 랩스 이미지에서 움직이는 개체를 자동으로 탐지, 추적 및 분석할 수 있습니다. 추적 기능은 셀 이동 및 분열과 같은 동적 프로세스를 정량화할 수 있는 강력하고 직관적인 도구입니다.

원격 개발 키트(RDK) 모듈

원격 개발 키트를 사용하여 Python, C++ 및 Matlab과 같은 언어로 FV3000 현미경의 특정 기능을 원격 제어하고 프로그래밍할 수 있습니다. RDK 모듈은 프로그래밍 경험이 있는 사용자가 시스템이 더 큰 잠재력을 발휘할 수 있게 해주는 강력한 도구입니다.